Category: 试剂
Catalog Number: WB-001
Price: ¥198.00
一、 产品组成与规格
本试剂盒分为三种规格,请根据您的实验需求核对产品清单:
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产品组成 |
WB-001-30ML |
WB-001-120ML |
WB-001-500ML |
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Westep® Anti-Rabbit-HRP |
30 ml |
120 ml |
500 ml |
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Westep® Wash Buffer(10 X) |
30 ml |
120 ml |
500 ml |
二、 保存条件
三、 产品简介
Westep® Blot Detector (Rabbit) 是一款专为追求高效的科研人员设计的超快速 Western Blotting 检测试剂盒。通过创新的抗体稀释与信号增强技术,本试剂盒将传统 Western Blotting 的繁琐流程极大简化。本试剂盒中Westep® Anti-Rabbit-HRP已包含偶联HRP的抗兔二抗,只需在其中加入的靶标蛋白的兔源(Rabbit)一抗,仅进行一步的抗体孵育实现Western Blotting快速检测。
极速流程: 仅需 10 分钟抗体孵育,全程最快 15-20 分钟即可获得结果。
化繁为简: 无需封闭(Blocking)、无需繁琐的一抗、二抗分开孵育及中间的多轮洗涤。
高灵敏度: 优化的无蛋白(Protein Free)缓冲液环境有效降低非特异性结合,确保条带清晰、背景干净。
通用性广: 兼容 PVDF 和 NC 膜,适用于所有兔源一抗。
四、 实验操作指南
1. 实验准备
2. 标准操作流程
(1)、抗体孵育: 将转印好的膜直接放入 10 ml 已配好的抗体工作液中。于水平摇床上(约 75 rpm)室温孵育 10 分钟。
(2)、抗体回收: 结束后回收抗体工作液,4°C 保存可重复使用 3-5 次。
(3)、洗涤: 加入 10-15 ml 1X Wash Buffer,于摇床上室温快洗 1 分钟 × 5 次。
(4)、显影: 滴加 ECL 发光液,放置 1 分钟后进行成像检测。
五、 注意事项
1. 禁止添加叠氮化钠: 叠氮化钠(NaN3)会强烈抑制 HRP 活性,请确保所有实验器具无该成分残留。
2. 膜的激活: 使用 PVDF 膜时必须先用甲醇激活,转印后切勿干膜。
3. 温度控制: 实验请在室温下进行,过低温度(如 4°C 孵育)会显著降低反应效率。
4. 适用范围: 仅供科研使用(Research Use Only)。
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现象 |
可能原因 |
建议解决方法 |
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无信号/信号弱 |
一抗种属错误/效价低 |
确认一抗为兔源;增加一抗量或延长孵育至 30 分钟。 |
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蛋白未转印成功 |
使用丽春红染色确认转印效果。 |
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背景过深 |
洗涤不充分 |
增加洗涤液用量、次数或提高摇床转速。 |
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一抗浓度过高 |
降低一抗加入比例,进行梯度优化。 |
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非特异性条带 |
抗体特异性差 |
建议换用特异性更高的 FastBody® 系列一抗。 |
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抗体使用次数过多 |
减少重复使用次数,建议不超过 5 次。 |
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白色“鬼带” |
抗体/ECL浓度过高 |
进一步稀释一抗或 ECL,避免信号瞬间猝灭。 |