Westep® Blot Detector（Mouse）一步法快速免疫印迹检测试剂盒

一、 产品组成与规格

本试剂盒分为三种规格，请根据您的实验需求核对产品清单：

二、 保存条件

• Westep^® Antibody Dilution Solution ，Westep® Wash Buffer (10X)： 4°C保存，有效期 12 个月。
• Westep® Anti-Mouse-HRP：-20°C保存，有效期 12 个月。

三、 产品简介

Westep® Blot Detector (Mouse) 是一款专为追求高效的科研人员设计的超快速 Western Blotting 检测试剂盒。通过创新的抗体稀释与信号增强技术，本试剂盒将传统 Western Blotting 的繁琐流程极大简化。本试剂盒中Westep^® Anti-Mouse-HRP已包含偶联HRP的抗鼠二抗，只需自己准备靶标蛋白的鼠源（Mouse）一抗，一抗和二抗同时仅进行一步孵育，实现的Western Blotting快速检测。

      极速流程： 最快仅需 5 分钟抗体孵育，全程最快 10-15 分钟即可获得结果。

      化繁为简： 无需封闭（Blocking）、无需繁琐的一抗、二抗分开孵育及中间的多轮洗涤。

      高灵敏度： 优化的缓冲液环境有效降低非特异性结合，确保条带清晰、背景干净。

      通用性广： 兼容 PVDF 和 NC 膜，适用于所有鼠源一抗。兼容各种磷酸化抗体，生物素抗体。

四、 实验操作指南

1. 实验准备

• 1X Wash Buffer： 每10 ml Westep® Wash Buffer (10X) 浓缩液，加入 90 ml 超纯水，充分混匀。
• 抗体工作液： 每10 ml Westep® Antibody Dilution Solution，按比例加入Westep® Anti-Mouse-HRP   10 μl，鼠源一抗（推荐：配合 FastBody® 系列一抗使用，比例为 1:1000 即加入 10 μl；其他一抗请根据效价调整，一般根据商家推荐的量加入即可）。

¡   注：抗体工作液用量根据膜的大小来确定，一般一张8X6mm²的膜用10ml，剪成1-2cm宽的条形膜，可用2-3ml即可。1X Wash Buffer用量按照抗体工作液用量的5倍来配。

2. 标准操作流程

（1）、膜预洗：将转印好的膜直接放入1X Wash Buffer中。于水平摇床上（约 75 rpm）室温洗2次，每次 1 分钟。

（2）、抗体孵育： 再将膜放入抗体工作液中，于水平摇床上（约 75 rpm）室温孵育 5 -60分钟（本公司FastBody®系列抗体仅需5-10分钟）。抗体孵育结束后可回收抗体工作液，短期4°C 保存可重复使用 3-5 次。

（3）、洗涤： 加入1X Wash Buffer，于摇床上室温洗  3 次，每次1 分钟。

（4）、显影： 滴加 ECL 发光反应液，反应 1 分钟后进行成像检测。

六、 注意事项

1.     禁止添加叠氮化钠： 叠氮化钠（NaN3）会强烈抑制 HRP 活性，请确保所有实验器具无该成分残留。

2.     膜的激活： 使用 PVDF 膜时必须先用甲醇激活，转印后切勿干膜。

3.     温度控制：  实验请在室温下进行，如需长时间抗体孵育，请于4°C 孵育1小时或过液。

4.   适用范围： 仅供科研使用（Research Use Only）。